I. ПОДГОТОВКА К ОПЕРАЦИИ
Очистка и дезинфекция
Разборка и очистка : После разборки различных компонентов реактора (цистерна, трубопровод, электрод и т. Д.), соответственно, промыть промывкой и 1% раствором гидроксида натрия, промыть очищенной водой более 10 раз.
Дезинфекционная обработка : После очистки детали пропитываются дезинфицирующим раствором (разбавлены пропорционально) в течение 30 минут, после высыхания избегая прямого контакта с поверхностью.
Обслуживание датчика : pH - электрод пропитан насыщенным раствором KCl, растворенный кислород (DO) электрод заменяет электролит и исключает пузырьки, поляризуется более 6 часов.
2. Сборка цистерн
Упаковка: Выровняйте крышку резервуара с основанием цистерны и равномерно закручивайте винт под углом внутренним шестиугольным инструментом, чтобы обеспечить герметичность.
Соединение трубопроводов : Подключение баллонов добавки, выхлопных баллонов, бутылок для отбора проб и т. Д. через силиконовый шланг или быстрый разъем, электрод вставляется в соответствующий интерфейс и затягивается вручную.
II. Эксплуатация верхних резервуаров
1) Клеточная вакцинация
После того, как предварительно культивированная клеточная суспензия смешивается и равномерно подсчитывается, она передается в вакцинную бутылку и стерильно соединяется с входной трубкой реактора.
Используйте сжатый воздух, чтобы подвесить клетки гидравлически в реактор, чтобы избежать оседания клеток.
Инициализация параметров
Настройка окружающей среды : Температура установлена на 37°C (клетки млекопитающих), растворенный кислород 40%, pH около 7.0, через панель управления запускается автоматическая регулировка.
• Дополнения и вентиляция : ползучий насос контролирует скорость регидратации, система впуска регулирует давление кислорода до 0,1 МПа, чтобы обеспечить стабильность растворенного кислорода.
III. Контроль процесса культивирования
• 1. Динамический мониторинг
• Подключение датчика : мониторинг температуры, pH, DO и других параметров в режиме реального времени, контроллер автоматически регулирует скорость перемешивания (100 - 300 rpm) и скорость пополнения.
• Онлайновый отбор проб: каждые 24 часа отбираются пробы для определения плотности клеток и метаболического состояния, после отбора проб в конце трубопровода погружается 75% алкоголя для предотвращения загрязнения.
2. Борьба с загрязнением
Операция на протяжении всего процесса для поддержания стерильной среды, использование огневой дезинфекции разъема, чтобы избежать входа внешних примесей.
IV. Эксплуатация и техническое обслуживание цистерн
1) Прекращение культивирования
Закройте модуль автоматического управления и сбросите питательную жидкость в барабан с отходами через сжатый воздух, отключив соединение электродов.
Очистка и хранение
Компоненты цистерны демонтируются, после промывки очищенной водой погружаются в раствор 0,1 м NaOH на ночь и полностью удаляют биологические остатки.
После сушки хранится в вентиляционном помещении, электроды хранятся отдельно в специальной упаковке.
V. Ключевые вопросы, требующие внимания
1, проверка герметичности : После сборки необходимо провести стресс - тест, чтобы избежать утечки во время культивирования.
2, калибровка параметров : Перед каждым использованием необходимо корректировать электроды pH и DO для обеспечения точности данных.
3, Масштабное усиление : Следуйте постоянному соотношению объема вентиляции и объема жидкости (VVM), чтобы обеспечить эффективность передачи растворенного кислорода.
Благодаря вышеуказанным шагам клеточный биореактор из нержавеющей стали может обеспечить стабильную клеточную культуру от лабораторных до экспериментальных масштабов и подходит для высокоточных биологических процессов, таких как производство антител и разработка вакцин.