2024год12Май, Университет КюсюФахмида Хабиб НабилаЖдем команду вACS Наука и инженерия по биоматериалам"Опубликовано исследование. В исследовании были разработаны биосовместимые жидкости на основе липидов для устранения технических узких мест в доставке инсулина через кожу[EDMPC] [Лин]Это липоиды (ETи транс - липоиды (ТЭТ1) нанокапсульные препараты, путем предварительного смешивания-Оптимизация процесса покрытия для достижения эффективного проникновения инсулина через кожу, для диабета обеспечивает неинвазивную, долгосрочную программу введения.

резюме

Передача инсулина через кожу является потенциальным вариантом лечения диабета, который обеспечивает контролируемое замедление и продлевает действие препарата. Но количество инсулина больше (5800 днейТрудно пассивно проникать в роговой слой кожи, и требуется высокая дозировка препарата, что ограничивает его коммерческое применение. В этом исследовании была разработана биосовместимая жидкость на основе липидов[EDMPC] [Лин]Это липоиды (ETи транс - липоиды (ТЭТ) нанокапсульные препараты. Динамическое рассеяние света,ζПотенциальные, линзовые и с общей фокусировкой лазерные сканирующие микроскопические исследования показывают, что диаметр частиц нанокапсулы стабилен, в4℃Можно стабильно сохранять3Свыше 6 месяцев. С флуоресцентным изотиоцианатом, помеченным инсулином (FITC-ИныКонтролируемые растворы и другиеТЭТПо сравнению с препаратом, содержитИПМ的ETиТЭТ1Препарат усиливается, изменяя молекулярную структуру рогового слояFITC-ИныПроникновение через кожу у мышей и свиней (p < 0,0001В)). Исследования трехмерной модели искусственной кожи in vitro и модели мышей с диабетом в организме показали, что эти нанопузырьки биологически совместимы и не стимулируют (выживаемость клеток)> 80%В)). по30 МЕ/кгПосле введения дозы на мышах с диабетом через кожу,ETиТЭТ1Препарат снижает первоначальный высокий уровень сахара в крови (>150 мг/дл), соответственно снижает уровень сахара в крови62%и34%И поддерживать низкий уровень сахара в крови выше15Часы, в то время как инъекционная группа поддерживается только2ч 00 м. этотETиТЭТ1Препарат обладает потенциалом применения в коммерческих инсулиновых пластырях.

экспериментМатериалы и эксплуатационные приборы

(i) Экспериментальные материалы

1. Химические реагенты: изопропилкардаминовая кислота (ИПМ) Твен-80(Т80), СЭП-20(С20),1,2 -МускатноацилСн-глицерин- 3 - -Гидрофосфат (DMPCЭфир трифторметилсульфоновой кислоты,3 - -（4,5 -Диметил- 2 - -Тиазолы)- 2,5 - 2,5Дифенил- 2H-Тетраазол (МТТИзомеры рекомбинантного инсулина, флуоресцентного изотиоцианата1(ФИТК-I),99,5%Этанол, линолевая кислота,ПД-10ГлюкозаГ-25 МСтолб, буфер Дюринга (Д-ПБСПоджелудочно - протеаза/Тетрауксусная кислота (ЭДТАИзопропиловый (ИПААцетилонитрил (ACNВ)).

2. Модель и образец: трехмерная реконструкция модели человеческого эпидермиса,HR-1Отрезка кожи у мышей, самка крошечной свиньи Юкатан (ИМП(Замороженные образцы кожи,5Чжоу Боулинг мужские диабетические мыши.

3. Набор реагентов: иммуноадсорбция инсулиназы человека (ЭЛИСА) Набор реагентов.

(2) Экспериментальные приборы

1.Описание приборов: Динамический рассеиватель света, хроматограф, просвечивающий электронный микроскоп, лазерный сканирующий микроскоп с общей фокусировкой.

2.Оборудование для анализа и осмоса:МодернизацияФранцДиффузионный бассейнМногофункциональный энзимометр, спектрометр (Перкин Элмер),ASCHСканирование испаренияприбор для измерения потери влаги через кожуА.

Экспериментальный процесс

1.Приготовление нанокапсул.иПризнаки состава.

2.Эксперимент по проникновению наружной кожи: применениеМодернизацияФранцДиффузионный бассейнПрименять препарат к роговому слою кожи свиней,32.5℃Инкубация24Часы, через энзимометр для определения содержания в приемной жидкостиFITC-ИныСодержание; После замораживания разреза глубина проникновения кожи проверяется с помощью конфокального микроскопа.

МодернизацияФранцДиффузионный бассейн

3.Анализ структуры рогового слоя: обработанная препаратом кожа отделяет роговой слой, с помощью спектрометра обнаруживает характерные пиковые сдвиги липидов и кератинов и анализирует изменения в молекулярной структуре.

4.Эксперимент по раздражению in vitro и in vitro: использование трехмерной модели искусственной кожи in vitro, черезМТТМетод определения выживаемости клеток; Препараты вводятся на кожу мышей с диабетом, черезASCHСканирование испаренияприбор для измерения потери влаги через кожуобнаружение24Часы и48Часы работы кожного барьера.

АШ ВАПОСКАНприбор для измерения потери влаги через кожу

5.Фармацевтическая эффективность и фармакокинетика в организме:ETиТЭТ1Препараты (30 МЕ/кг) Кожа наносится на мышей с диабетом, мониторинг24Часовые изменения сахара в крови; Пробы крови берутся в разное время.ЭЛИСАНабор реагентов измеряет концентрацию инсулина в плазме крови и анализирует фармакокинетические параметры.

Экспериментальные выводы

1.Успешно подготовлен.ETиТЭТ1Нано - капсульные препараты,ETПриблизительный размер зерна160 нм(ПДИ <0,3),ТЭТ1Приблизительный размер зерна400 нм(ПДИ <0,15Все они обладают хорошей физической стабильностью,4℃хранение3Месяц без скопления, разделения фаз или осаждения лекарств.

2.Препарат обладает отличной биосовместимостью, выживаемость клеток вне организма> 90%Потеря влаги через кожу в организме не имеет значительных изменений, функция кожного барьера может быть в48Восстановление в течение часа без раздражения.

3.Эксперименты по проникновению наружной кожи подтвердили,ETиТЭТ1Препарат может значительно повысить проницаемость инсулина путем изменения текучести липидов в роговом слое и структуры кератина; В экспериментах внутри тела,ETПрепарат снижает уровень сахара в крови у мышей с диабетом62%А,ТЭТ1Снижение состава34%И оба могут поддерживать низкий уровень сахара в крови.15Часы, это группа инъекций (2Часовой)7В два раза больше.

4.Препарат не требует инвазивных операций, избегает боли, риска заражения и чрезмерно высоких пиков инсулина, вызванных инъекциями, предлагает новую стратегию доставки инсулина и других пептидных препаратов через кожу и имеет значительный потенциал для коммерческого применения.