двухволновая система хроматографии низкого давления типа DAS

Сфера применения системы разделения слоистой хроматографии в жидкой фазе низкого давления: биохимия, синтетическая химия, природные продукты, разработка лекарств, пищевая химия, агрохимия, косметика, полимеры и нефтехимия и другие отрасли научных исследований и подготовки. Может быть проведена ионообменная слоистость, аффинная слоистость геля фильтрации, гидрофобная слоистость и другие методы, используемые для белков, ферментов, нуклеотидов, нуклеотидов, полипептидов, (содержащих / не содержащих ароматических аминокислот) и любых других биологических / неживых образцов с ультрафиолетовым поглощением, анализ разделения, обнаружение потока, является идеальным выбором для биомолекулярной очистки, он имеет многофункциональные, простые в использовании, экономические и другие характеристики. Небольшой дизайн, максимально экономящий пространство в холодильнике и лаборатории.

Примечания

Требования к различным техническим показателям высокопроизводительного двухлучевого ультрафиолетового детектора в конфигурации системы используются для количественного тестирования фармацевтических препаратов на заводе по всей стране. Особенности приборов и оборудования

Протеин 280 нм / 254нм

Белковые молекулы содержат ароматические аминокислоты, такие как сопряжённые двойные связи тирозин и триптофан. Они обладают свойствами поглощения ультрафиолетового света, пик поглощения которого находится на длине волны 280 нм, и значение плотности света на пике поглощения в этой длине волны прямо пропорционально его концентрации, поэтому они могут служить основой для качественного и количественного измерения белка, поэтому ультрафиолетовое поглощение на 280 нм обычно используется для непрерывного мониторинга концентрации белка в системе слоистости. Однако из - за различного содержания тирозина и триптофана в различных белках для точной количественной оценки необходимо, чтобы чистый продукт белка был измерен в качестве стандарта для сравнения или чтобы его коэффициент экстинкции был известен в качестве ссылки. Кроме того, многие не белковые вещества также имеют - постоянную абсорбционную способность при длине волны 280 нм, могут вызывать помехи. Особенно сильное воздействие оказывают нуклеиновые кислоты (пурин и пиримидин). Поглощение на 280 нм в 10 раз сильнее белка (на грамм), но

Нуклеиновые кислоты поглощаются сильнее на 254 нм, а пик их поглощения находится вблизи 254 нм. Коэффициент экстинкции нуклеиновой кислоты 254нм в два раза выше, чем 280нм, в то время как белки, напротив, поглощают ультрафиолетовое излучение 280нм больше, чем 254нм.

Обычно

Коэффициент поглощения света чистыми белками: A280 / A254 1.8

Коэффициент светопоглощения чистых нуклеиновых кислот: A280 / A254 0.5

Таким образом, при одновременном присутствии нуклеиновых кислот в белковом растворе (как и в большинстве биологических систем), OD254nm должен быть измерен одновременно с OD280nm. Затем, исходя из соотношения поглощения двух длин волн, истинное содержание белка было скорректировано эмпирической формулой, чтобы устранить влияние нуклеиновой кислоты.

Концентрация белка = 1,45 × A280 - 0,74 × A254 (мг / мл)

Эта эмпирическая формула была построена на основе данных, измеренных с помощью ряда известных смесей белков (дрожжевых энозидазы) и нуклеиновых кислот (дрожжевых нуклеиновых кислот) в различных концентрациях.

Настройка системы