(1) Потребности в питании

• Аминокислоты - - 12 необходимых аминокислот (валерин, лейцин, изолейцин, султан, лизин, триптофан, фенилаланин, метионин, гистамин, тирозин, аргинин, цистеин); Десять необязательных аминокислот; Кроме того, необходим глутамин, который играет важную роль в метаболизме клеток, и содержащийся в нем азот является источником синтеза пуринов и пиримидина в нуклеиновых кислотах, а также основным веществом, необходимым для синтеза трех, двух и монофосфатов.

• Углеводы - сахар - глюкоза; Лактоза; Клетки имеют самую высокую абсорбционную способность к глюкозе и низкую галактозу.

• Неорганические соли - натрий, калий, магний, фосфор, кальций и т.д.;

:: витамины - - биотины, фолиевая кислота, рибофлавин, витамин С, витамин В12, пиридоксин и т.д.;

• белки и пептиды - альбумин, депрессанты, протеин, фиброгликопротеин, трансферрин, факторы роста;

• жирные кислоты и липиды - линолевые кислоты, линолевые кислоты, холестерин и т.д.;

• Микроэлементы - железо, цинк, селен, медь, марганец, молибден, ванадий и т.д.

(2) Температура

Часто используемая температура составляет 37°, но необходимо обратить внимание на тканевые клетки из разных биологических источников, наиболее подходящая температура культивирования различна, а клетки устойчивы к низким температурам и не выдерживают высоких температур. В физиологическом температурном диапазоне температура положительно коррелирует со скоростью роста клеток.

(3) Проницаемое давление

Размер осмотического давления в основном определяется концентрацией различных солевых компонентов в питательной среде. Клетки должны жить в среде просачивания, такой как их собственные протоплазмы, если давление проникновения в среду обитания выше, чем у них самих, культивируемые клетки могут столкнуться с обезвоживанием и умереть, если давление проникновения в среду обитания ниже, чем у них самих, культивируемые клетки могут столкнуться с водопоглощающим ростом и разрушением, но большинство культивируемых клеток имеют определенную толерантность к осмотическому давлению. Давление проникновения плазмы крови человека 290 мOsm / kg можно рассматривать как идеальное осмотическое давление для культивирования клеток человека. Клетки крыс проникают под давлением 320 мOsm / kg. Для культивирования большинства клеток млекопитающих целесообразно контролировать осмотическое давление питательной среды в диапазоне 260 - 320 мOsm / kg.

(4) Газовая фаза

Газовая среда, в которой культивируются клетки вне организма, часто состоит из 5% CO2 и 95% воздуха. О2 участвует в энергетическом метаболизме клеток. CO2 используется для поддержания кислотности питательных веществ.

(5) pH

Среда pH, подходящая для роста большинства клеток, находится в пределах 7,0 - 7,4, а среда pH7.4 подходит для большинства клеточных линий млекопитающих. В питательной среде фенольный красный цвет используется в качестве индикатора pH для непрерывного мониторинга кислотно - щелочности питательной жидкости, при низких pH он делает питательную жидкость желтой, а при более высоких pH - фиолетовой, pH 7,2 - 7,4 - красной, подходящей для клеточной культуры.

(6) Без токсичности и загрязнения

Нетоксичность и стерильность являются предпосылками для культивирования клеток вне организма. В живых клетках система детоксикации и иммунная система могут противостоять вторжению микроорганизмов или других вредных веществ, но клетки в культуре in vitro не имеют защиты иммунной системы организма, что приводит к потере защиты от микроорганизмов и детоксикации вредных веществ. Таким образом, обеспечение нетоксичной и экологически чистой среды роста клеток является основным условием успеха клеточной культуры. В процессе клеточной культуры необходимо обратить внимание на предотвращение загрязнения токсичными химическими веществами, микробного загрязнения и перекрестного загрязнения между различными клетками.