Основные принципы работы жидкой хроматографии основаны на различиях в коэффициентах распределения компонентов в образце между фиксированной и текучей фазами. Когда гибридные образцы вводятся в жидкостную хроматографическую систему, они попадают в хроматографическую колонну, содержащую пористые гранулированные материалы с фиксированной фазой (например, силиконы, химические связующие фазы, полимеры и т.д.), с текучей фазой (например, жидкие растворители, такие как вода, метанол и ацетонитрил). Из - за различий во взаимодействиях между различными компонентами и фиксированной фазой (например, адсорбция, распределение, сопротивление дренажа, сродство и т. Д.), время их удержания в фиксированной фазе также варьируется. В частности, те компоненты, которые слабо взаимодействуют с фиксированной фазой, движутся быстрее с фазой потока и сначала вытекают из хроматографической колонны; В то время как компоненты, тесно связанные с фиксацией, перемещаются медленнее, а затем вытекают из хроматографической колонны. В ходе этого процесса компоненты смеси отделяются друг от друга. Кроме того, эффект разделения зависит не только от различий в коэффициентах распределения раствора между двумя фазами (термодинамические факторы), но и от динамических факторов, таких как коэффициент диффузии, фиксированная грануляция фазы, заполнение колонны и скорость потока фазы потока.

Внимание при использовании жидкой хроматографии:

1. Фазовый отбор и обработка потоков

- Растворитель класса HPLC или выше должен быть выбран для воды, требующей вторичной дистилляции или сверхчистой воды, и в настоящее время используется для предотвращения микробного размножения загрязняющих систем.

- Мобильная фазовая сборка должна быть восстановлена до комнатной температуры для повторного использования, чтобы избежать разности температур, приводящей к нестабильности производительности.

- При использовании буферного солевого раствора необходимо фильтровать и промывать проточные пути чистой водой до и после использования, запрещается оставлять буферный солевой раствор в потоке статически. В то же время хроматографические колонны должны быть сначала промыты низкопропорциональной органической фазой (содержание органической фазы не менее 5), а затем сохранены высокой пропорциональной органической фазой, чтобы избежать буферного солевого анализа. Старайтесь избегать использования высоких концентраций фосфатных буферных солей (> 10 ммоль / л).

- Избегать, насколько это возможно, использования чистого ацетонитрила в качестве проточной фазы, с тем чтобы предотвратить всасывание жидкости в результате полимеризации ацетонитрила. При необходимости рекомендуется использовать коричневые бутылки.

2. Оперативные нормы

- Соединение высоковольтных трубопроводов запрещено демонтировать под давлением.

- Будьте осторожны при настройке скорости потока, избегая резких изменений давления и температуры, предотвращая наполнение внутри ударной колонны.

- Изменение состава растворителя в тестируемом растворе образца должно происходить постепенно, особенно в антифазной хроматографии, и органический растворитель не должен заменяться чистой водой напрямую или наоборот.

После выключения источника ультрафиолетового детектора необходимо охладить его в течение 30 минут и выключить.

3. Обеспечение безопасности

- Отходы должны быть классифицированы для сбора, органические отходы не должны выбрасываться напрямую.

- Регулярное техническое обслуживание приборов, например промывка входных игл, замена уплотнительных прокладок и т.д.