Жидкая хроматография может обрабатывать смеси со сложным составом, большой полярностью или низкой стабильностью. Выбирая подходящий градиент фиксированной фазы и фазы потока, он может обеспечить эффективное разделение высоких температур кипения, макромолекул, термостаточных веществ (таких как белки, полисахариды, остатки пестицидов) без необходимости высокотемпературного нагрева, избегая проблемы разложения вещества. В сочетании с высокоточными системами отбора проб и высокочувствительными детекторами (например, ультрафиолетовыми, флуоресцентными, масс - спектрометрическими и т.д.) для удовлетворения потребностей в обнаружении следовых веществ (концентрация до мкг / л или даже нг / л). В качественном анализе состав вещества может быть точно идентифицирован с помощью двойной проверки с сохранением времени и характеристик спектра или масс - спектрометрии; В количественном анализе, используя метод внешней шкалы, метод внутренней шкалы и другие зрелые методы, можно достичь точного расчета концентрации вещества.

Жидкая хроматография использует жидкость в качестве проточной фазы, поскольку жидкость подвергается большему сопротивлению при прохождении через хроматографическую колонну, поэтому для обеспечения быстрого прохождения фазы потока через хроматографическую колонну требуется высокое давление (обычно до 150 - 35 000 кПа). В то же время скорость потока в колонне также намного быстрее, чем в классической жидкой хроматографии (обычно до 1 - 10 мл / мин), что значительно сокращает время анализа. Широко используются высокочувствительные детекторы, что еще больше повышает чувствительность анализа. Например, чувствительность флуоресцентных детекторов может достигать уровня 10 г, а количество проб невелико и обычно требует всего несколько микролитров.

По сравнению с газовой хроматографией, жидкостная хроматография не ограничена летучестью образца и может анализировать органические вещества с высокой температурой кипения, плохой тепловой стабильностью и большой относительной молекулярной массой (более 400). Эти вещества составляют почти 75 - 80 процентов от общего количества органических веществ и в принципе могут быть отделены и проанализированы с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии. Как правило, они оснащены автоматизированными системами отбора проб и программным обеспечением для обработки данных, что делает процесс более простым и быстрым и снижает риск ошибок человека.

Шаги измерения жидкой хроматографии:

1. Предварительная обработка образцов

- Экстракция: Предполагаемый образец около 10 г (с точностью до 0,1 г) в конической бутылке 100 мл с добавлением 60 мл смешанного экстракта и 2 г хлорида натрия, колебание 30 мин. Отфильтрована фильтрующей воронкой с отверстием 80 - 120 мкм, остатки промыты смесью экстракта 3×10 мл. Сочетание фильтрата и моющего средства в 250 - миллиметровой чашке. Нагреть 30 мин в кипящей воде, снять, центрифугировать 20 мин в 3000 р / мин, охладить 20 мин в холодильнике 4°C и затем отфильтровать через фильтрующую воронку с отверстием от 40 до 80 мкм, чтобы собрать фильтр.

- Очищение: Если состав образца сложен, может быть проведена дальнейшая очистка с помощью таких методов, как твердофазная экстракция.

- Концентрированная постоянная емкость: экстракт концентрируется азотным продувочным устройством до почти сухого уровня, а содержание метанола - до соответствующего объема, который должен быть измерен после фильтрации с микроотверстием 0,22 мкм.

2. Подготовка приборов

- Фазовая сборка потока: выберите растворитель класса HPLC или выше, подготовьте фазу потока пропорционально и отфильтруйте фильтром 0,22 мкм, прикройте крышку бутылки с выхлопным отверстием при использовании.

- Установка хроматографической колонны: хроматографическая колонна правильно устанавливается в термостат колонны, соединяется с трубопроводом, чтобы убедиться, что утечки нет.

- Баланс системы: промывание системы в фазе потока не менее 30 минут до стабилизации базового уровня.

3. Пробный анализ

- Погрузка образца: раствор образца вводится в кольцо образца, чтобы избежать образования пузырьков.

- Сбор данных: Запуск хроматографической рабочей станции, начало сбора данных, запись хроматографии.

4. Обработка данных

- Качественная количественная оценка: количественная оценка с использованием метода внешней или внутренней шкалы в соответствии с характеристикой времени удержания.

- Отчет о результатах: Расчет содержания целевого соединения в образце и выдача отчета об испытании.