Человеческий интерлейкоин 22 (IL - 22) Техническая инструкция по набору для тестирования ELISA

BS - 1649 Человеческий интерлейкин 22 (IL - 22) Набор ELISA

I. ОБЗОР ПРОДУКТА

В этом наборе для количественного определения концентрации интерлейкоина 22 (IL - 22) в сыворотке крови человека, плазме крови или очищающей жидкости клеточной культуры используется метод иммуноадсорбции с двойным антитело - заполнителем (ELISA). Ил - 22 является цитокином, выделяемым активированными Т - клетками, NK - клетками и т. Д. Он играет важную роль в воспалительных реакциях, восстановлении тканей и иммуномодуляции. Набор обладает высокой чувствительностью, высокой специфичностью и хорошей повторяемостью, подходит для научных экспериментов и клинических испытаний.

II. Принцип обнаружения

Упакованное антитело: античеловеческое моноклональное антитело IL - 22 предварительно упаковано в микропористую пластину, которая связывается с IL - 22 в образце, чтобы сформировать твердофазный комплекс.

Антитела, маркированные биотином ‌: Добавляются античеловеческие антитела IL - 22, маркированные биотином, которые связываются с IL - 22, чтобы сформировать структуру сэндвич.

Ассоциированный фермент ‌: Добавьте стрептотропин, маркированный пероксидазой хрена (HRP), который связывается с биоспецифичностью.

Яркая реакция ‌: Добавьте субстрат (TMB), чтобы показать цвет, темный цвет прямо пропорционален концентрации IL - 22.

Конец и измерение ‌: Добавьте окончательную реакцию жидкости, чтобы измерить поглощение света (OD) на длине волны 450 нм и рассчитать концентрацию образца ‌ по стандартной кривой.

III. Состав комплекта реагентов

Количество компонентов

Предварительная упаковка микропористой пластины 96 отверстий / 1 блок

Стандартная продукция (замороженная сушка) 2 нг / шт. 2 шт.

Стандартный разбавленный раствор 10 мл 1 бутылка

Антитела с биомаркером 6 мл 1 бутылка

HRP Метка стрептомицина 6 мл 1 бутылка

Стиральная жидкость (20×) 50 мл 1 бутылка

Цветовая жидкость (TMB) 11 мл 1 бутылка

Концовочная жидкость (2M H2SOnenenebo) 6ml 1 бутылка

IV. Требования к выборке

Сыворотка / плазма ‌: После сбора комнатная температура статическая в течение 30 минут, центрифуг (2000 × g, 15 минут) взять очищение, 20°C или - 80°C сохранить, чтобы избежать повторного замораживания и оттаивания.

Клеточная культура верхняя очистка ‌: центробежное удаление фрагментов клеток, немедленное обнаружение или раздельное хранение.

Примечание ‌ Избегайте консервантов, таких как азид натрия (NANnenenebj) или EDTA, в образцах, чтобы не повлиять на результаты испытаний.

V. Оперативные шаги

Стандартное товарное разбавление ‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌

Добавление проб: 100 мкл стандартного продукта или образца на отверстие, инкубация при температуре 37°C в течение 90 минут.

Очистка: Выбросьте жидкость из отверстия, промывайте пластину моющим раствором 3 раза, каждый раз погружайте в течение 1 минуты.

Добавьте биотин - маркер антитела ‌: 100 мкл на отверстие, 37 °C инкубация 60 минут.

Ассоциированный фермент ‌: 100 мкл на отверстие, инкубация при 37°C в течение 30 минут.

Цвет и конец ‌: Добавьте 90 мкл ТМБ на отверстие, избегая яркости в течение 15 минут, добавьте 50 мкл конца жидкости.

Измерение ‌: при длине волны 450 нм считывается значение OD, составляется стандартная кривая и рассчитывается концентрация ‌ в выборке.

VI. Расчет результатов

Стандартная концентрация продукта как горизонтальная координата, значение OD как вертикальная координата, нарисовать стандартную кривую.

Соответствующая концентрация на стандартной кривой, основанная на значении OD образца, умножается на кратное разжижение (если образец не разбавлен, умножается на 1).

Рекомендуется использовать специализированное программное обеспечение (например, ELISA Calc) для выравнивания кривых и расчета концентрации.

VII. Показатели эффективности

Чувствительность ‌: Контроль ограничен 0,015нг / мл.

Точность ‌: Коэффициент вариации в партии (CV) < 10%, в партии CV < 15%.

Линейный диапазон ‌: 00625 - 2нг / мл, коэффициент корреляции (R²) > 0,99.

Коэффициент рекуперации ‌: стандартная рекуперация образцов с высокой, средней и низкой концентрацией, коэффициент рекуперации от 85% до 115%.

Специфический ‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌

VIII. ПРИМЕЧАНИЯ

Сохранение реагента ‌: сохранение неоткрытого комплекта реагента при температуре 2–8°С, срок действия 12 месяцев; После вскрытия стандартные продукты, биометрические маркированные антитела, маркеры HRP должны быть упакованы и заморожены, чтобы избежать повторного замораживания и оттаивания.

Оперативная инструкция ‌: При переносе жидкости избегайте образования пузырьков, при промывке убедитесь, что жидкость в отверстии выбрасывается.

Безопасность‌: Концовочный раствор содержит сильную кислоту, при работе носите перчатки и защитные очки.

Контроль качества ‌: В каждой партии экспериментов должна быть установлена двойная пористая повторная проверка, а при аномальных значениях OD требуется повторное обнаружение.

IX. Анализ часто задаваемых вопросов

Возможные причины возникновения проблемы

Стандартная кривая линейная разность стандартный продукт разбавление ошибка перегруппировка стандартный продукт

Переосмысление после разбавления проб

Проверка на деактивацию гипернеглубоких или неявных соединений ферментов, замена новых реагентов

В отверстии после промывки есть остаточная жидкость, которая не имеет достаточного количества промывки или интенсивности, чтобы увеличить количество промывки, сильно ударить по сухой диафрагме

Примечание: Выше только для справки, этот реактив предназначен только для научного использования, не как фактические данные, эксперимент должен строго следовать инструкциям или консультироваться с учителем техники.

Тяньцзинь Беншэн всегда рассматривал контроль качества как жизнь предприятия и стремился к постоянному повышению конкурентоспособности предприятия. В своей деятельности компания всегда придерживается: соблюдать закон, строго соблюдать закон, относиться к себе снисходительно, осмелиться взять на себя дух предпринимательства в качестве стандарта, с отличным качеством и отличным обслуживанием для поддержания и расширения рынка, в большей степени удовлетворять потребности клиентов. Выигрыш с клиентами - наша цель развития. Бенсон! Ваш доверенный партнер. Мы готовы искренне сотрудничать с вами, чтобы создать лучшее будущее. Набор Бенсона